اثر عوامل رشد حاصل از ژل پلاكتي بر تكثير و تمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي
Journal Title: Khoon - Year 2009, Vol 6, Issue 2
Abstract
اثر عوامل رشد حاصل از ژل پلاكتي بر تكثير و تمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مريم اماني1، دكتر ناصر اميري‌زاده2، دكتر مسعود سليماني3، دكتر حسين ملكان4، دكتر مهريار حبيبي رودكنار5، مريم بشتر6 چكيده سابقه و هدف سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي(MSCs)، جمعيت سلولي موجود در مغز استخوان هستند كه توانايي تكثير و تمايز بالقوه‌اي دارند. به منظور تكثير و تمايز سلول‌هاي مزانشيمي، از FBS به عنوان يك مكمل در محيط كشت استفاده مي‌شود كه با خطر انتقال انواع عفونت‌ها و ايجاد واكنش‌هاي ايمني همراه است. ژل پلاكتي اتولوگ، از اجزاي طبيعي خون خود فرد تهيه مي‌شود. پلاكت‌هاي فعال شده، عوامل رشدي را آزاد مي‌سازند كه خاصيت ميتوژنيك براي سلول‌هاي مزانشيمي دارند. هدف از اين مطالعه، بررسي تاثير عوامل رشد پلاكتي بر روي تكثير و تمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي است. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع تجربي بود. سلول‌هاي تك هسته‌اي مغز استخوان جدا شده و در محيط كشت DMEM و 10% FBS كشت داده شدند. سلول‌هاي حاصل از پاساژ اول با بررسي شاخص‌هاي CD45 ، CD166 ، CD90 ، CD105 ، CD44 و CD34 به روش فلوسايتومتري مورد تاييد قرار گرفتند. با افزودن ترومبين و كلسيم به پلاسماي غني از پلاكت، ژل پلاكتي تهيه شد. ژل پلاكتي به مدت 30 دقيقه، 6، 24، 48 و 72 ساعت در گرماخانه 37 درجه سانتي‌گراد نگهداري و ميزان عوامل رشد پلاكتي در اين مايع با استفاده از روش الايزا اندازه‌گيري شد. سلول‌هاي مزانشيمي در محيط حاوي سرم 10% و محيط حاوي عوامل رشد پلاكتي 10% به مدت 8 روز كشت و تكثير داده شدند. ميزان تكثير سلول‌ها با استفاده از روش MTT بررسي شد. سلول‌هاي مزانشيمي بر روي داربست سه بعدي تري‌كلسيم فسفات كشت داده شدند و در نهايت ميزان رشد و مورفولوژي سلول‌ها با استفاده از ميكروسكوپ الكتروني بررسي شد. يافته‌ها سلول‌هاي مزانشيمي با موفقيت جدا شده و در محيط حاوي فاكتورهاي رشد پلاكتي تكثير يافتند. از نظر مورفولوژي، سلول‌هاي مزانشيمي كشت داده شده مشابه سلول‌ها در محيط حاوي سرم بودند. سلول‌ها داراي شاخص‌هاي(8/98%)CD166 ،(93%)CD105 ،(96%)CD90 و (5/99%)CD44 و فاقد شاخص‌هاي سلول‌هاي خونساز نظير(8/2%)CD34 و(8/3%)CD45 بودند. تفات قابل توجهي از نظر بيان شاخص‌ها بر روي سلول‌ها در دو محيط مشاهده نشد. در اين مطالعه نشان داده شد كه عوامل رشد پلاكتي نسبت به سرم، سبب افزايش بيشتر تعداد سلول‌ها مي‌شوند. به علاوه سلول‌هاي مزانشيمي كشت داده شده در حضور فاكتورهاي رشد پلاكتي، خاصيت استئوژنيك خود را حفظ كردند. تمايز استئوژنيك سلول‌هاي مزانشيمي با رنگ‌آميزي رسوبات معدني با Alizarin red و افزايش بيان آلكالين فسفاتاز تاييد شد. نتيجه گيری عوامل رشد پلاكتي را مي‌توان جايگزين سرم در محيط كشت سه بعدي نمود. اين عوامل محيط مناسبي را براي رشد سلول‌هاي مزانشيمي فراهم مي‌سازند. توانايي تمايز استئوژنيك سلول‌هاي مزانشيمي در اين محيط حفظ مي‌شود. كلمات كليدي: سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي، استئوژنزيس، داربست بافتي تاريخ دريافت : 6 /6/87 تاريخ پذيرش : 31/5/88 1ـ كارشناس ارشد خون‌شناسي و بانك خون ـ مركز تحقيقات سازمان انتقال خون ايران 2ـ مؤلف مسؤول: PhD خون شناسي و بانك خون ـ استاديار مركز تحقيقات سازمان انتقال خون ايران ـ صندوق پستي: 1157-14665 3- PhD خون‌شناسي و بانك خون ـ استاديار دانشكده پزشكي دانشگاه تربيت مدرس 4- متخصص ارتوپدي ـ بيمارستان آتيه 5ـ PhD بيوتكنولوژي ـ استاديار مركز تحقيقات سازمان انتقال خون ايران 6ـ كارشناس پرستاري ـ مركز تحقيقات پيوند خون و مغز استخوان بيمارستان شريعتي
Authors and Affiliations
M. Amani , N. Amirizadeh, H. Malekan
Keywords
Related Articles
- EP ID EP84522
- DOI -
- Views 126
- Downloads 0
Legal, social, and economic consequences of transfusion-transmitted infections in Iran and in the world
Legal, social, and economic consequences of transfusion-transmitted infections in Iran and in the world Eshghi P.1,2(MD), Cheraghali A.M.1,3(PhD) 1Research Center of Iranian Blood Transfusion Organization, Tehran,...
مقايسه مشكلات بيماران تالاسمي ماژور با پيگيري منظم و پيگيري نامنظم اصول درماني در مراجعه‌كنندگان به مركز درماني تالاسمي شهر تهران
مقايسه مشكلات بيماران تالاسمي ماژور با پيگيري منظم و پيگيري نامنظم اصول درماني در مراجعه‌كنندگان به مركز درماني تالاسمي شهر تهران بهشته طبرسي1، اكرم مرباغي2، دكتر محبوبه صفوي3، مريم افخمي4 چكيده سابقه و هدف ت...
Comparative survey of problems in thalassemia major patients with regular and irregular follow ups of therapeutic principles
Comparative survey of problems in thalassemia major patients with regular and irregular follow ups of therapeutic principles Tabarsi B.1(MS), Marbaghi A.2(MS), Safavi M.1(PhD), Afkhami M.3(BS) 1 Azad University o...
اثر عوامل رشد حاصل از ژل پلاكتي بر تكثير و تمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي
اثر عوامل رشد حاصل از ژل پلاكتي بر تكثير و تمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مريم اماني1، دكتر ناصر اميري‌زاده2، دكتر مسعود سليماني3، دكتر حسين ملكان4، دكتر مهريار حبيبي رودكنار5، مريم بشتر6 چكيده سابقه و هدف سلول‌هاي...
The investigation of CD34+cord blood stem cells expansion in DBM scaffold under the influence of nicotinamide
Background and Objectives The low number of umbilical cord blood cells is an important barrier to successful bone marrow transplantation. Therefore, the growth of these cells while maintaining their functional characteri...