Cloning of sequence of homologous crt-cluster in Streptomyces globisporus 1912-бп
Journal Title: Фактори експериментальної еволюції організмів - Year 2018, Vol 22, Issue
Abstract
Aim. The aim was to set influence to the additional homologous crt-cluster on carotenogenesis of cells of streptomycete recipient. Methods. For this purpose transformation by the hybrid plasmid pWC 9,6 was conducted. This plasmid contained the fragment of the crt-cluster sequence (9576 bp) of Crt+-mutant S. globisporus Crt4 in a Crt--recipient S. globisporus 1912-бп. To construct this hybrid plasmid, a fragment of PLR-copies of sequence of the crt-cluster of mutant S. globisporus 1912 Crt4 was cloned in the shuttle vector pWHM4 (6.6 kb). Insertion was done into unique restriction sites for endonucleases XbaI and HindIII in a polylinker of this vector. These endonucleases have not restriction sites into the crt-cluster sequence. Results. The plasmid pWC 9,6 (16.2 kb) that contains the crt-cluster sequence (9576 bp) of the Crt+-variant Crt4 of the strain S. globisporus 1912 was constructed. The plasmid successfully functions in the cells of both recipients (E. coli XL1 Blue and S. globisporus 1912-бп). It provides to them resistance to the corresponding antibiotics. The plasmid pWC 9,6 stably keeps its molecular size (16.2 kb). However, indisputable proofs of expression of the crt-clusters in transformants were not got. Conclusions. The plasmid pWC 9,6, that is able to transform and stably function in the cells of both recipient microorganisms (Streptomyces and E. coli) was constructed. Keywords: crt-cluster, shuttle vector, cloning, resistance, PCR.
Authors and Affiliations
В. В. Лук'янчук, Л. В. Поліщук
Keywords
Related Articles
- EP ID EP618784
- DOI -
- Views 57
- Downloads 0
Транскрипційний фактор CAT8 залучений в регуляцію ферментації ксилози в рекомбінантному штамі Saccharomyces cerevisiae
Мета. Мета даної роботи полягає в конструюванні cat8Δ на основі ксилозоферментуючого штаму S. cerevisiae та аналізі алкогольної ферментації ксилози. Методи. Було сконструйовано касету для делеції гена CAT8, що містить ма...
Неканонічні ДНК-зв’язувальні властивості потенційних компонентів протипухлин-ної композиції (цитокін AIMP1/p43, лектин SNA, ізатізон), які здатні впливати на різні мішені
Мета. Дослідити ДНК-зв’язувальні властивості різних препаратів, перспективних для створення протипухлинної композиції (AIMP1/p43, SNA-I, ізатізон), а також їх здатність впливати на ключові матричні процеси – транскрипцію...
Вплив різних факторів на антирадикальну активність екстрактів Panax ginseng С. A. Meyer
Мета. Метою роботи була оцінка антирадикальної активності екстрактів підземних і надземних органів женьшеню Panax ginseng C.A. Mey залежно від різних факторів – віку рослин, часу збору і умов культивування. Методи. Екстр...
Modern methodical approaches to evaluation of the state of park forest ecosystems
Aim. The aim of the research is to improve the methodological bases of the integrated the assessment of park forest ecosystems under the conditions of anthropogenic loading and to determine the direction of processes occ...
DNA markers of AHAS1 gene for screening and identification of sunflower genotypes of hybrid origin
Aim. A molecular genetic study of sunflower F1 and F2 hybrids on a microsatellite markers of mutant AHAS1 gene associated with herbicide resistance was performed. The aim of the work was to screen of F1 and F2 sunflower...