До методики отримання стовбурових клітин міокарда котів
Journal Title: Науковий вісник Львівського національного університету ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.З. Гжицького - Year 2018, Vol 20, Issue 88
Abstract
Початком дослідження стовбурових клітин серця можна вважати 2003 рік, коли Beltrami A.P. з колегами підтвердили наяв-ність останніх у міокарді. Пізніше Makkar R.R. та ін. довели ефективність даних клітин за лікування ішемії міокарда. Проте, незважаючи на позитивний ефект від застосування міокардіальних стовбурових клітин за ішемії міокарда, перешкодою для їх масового клінічного застосування є етичні суперечності та складність в отриманні. Зважаючи на вищесказане, метою нашої роботи було визначення оптимального методу отримання стовбурових клітин з міокарду кота. Експерименти на тваринах були виконані відповідно до вимог “Загальних етичних принципів експериментів на тваринах”, схвалених I Національним конгресом з біоетики (20.09.04 р., Київ, Україна). Для отримання тканин серця використовували завмерлі плоди кошенят (за згоди господарів), що залишалися після надання рододопомоги. Для визначення оптимального методу отримання культури стовбурових клітин міокарда кота нами було порівняно метод експланту та методи ферментативної обробки тканин з використанням різних комбінацій ферментів: 2 мг/мл колагенази (тип ІІ); 2 мг/мл колагенази (тип ІІ) з додаванням 5% бичачого сироваткового альбуміну (BSA); 1 мг/мл колагенази (тип ІІ),1 мг/мл гіауронідази та 5% BSA; 2,5% трипсину; 2,5% трипсину, 0,5 мг/мл колагенази (тип ІІ) та 0,5 мг/мл гіалуронідази. Найбільш оптимальним методом отримання культури стовбурових клітин міокарда вважали метод, за якого найшвидше утворювався моношар клітин у одній із чашок Петрі. При цьому враховували кількість клітин у моношарі, які підраховували у камері Горяєва за допомогою мікроскопу при збільшенні у 200 разів. Найбільш ефективним методом отримання культури стовбурових клітин міокарда котів є використання комбінації ферментів: 2,5% трипсину, 0,5 мг/мл колагенази (тип ІІ) та 0,5 мг/мл гіалуронідази, що дозволяє з 10 мг тканин серця отримати 986,0 ± 9,3 тис. клітин, здатних до проліферації. Найменш ефективним виявився метод експланту (без використання ферментів), оскільки кількість прикріплених до культурального пластику клітин за його використання на 5 добу культивування складала 35,7 ± 6,2 тис.
Authors and Affiliations
О. С. Ковпак, В. В. Ковпак, А. Й. Мазуркевич
Keywords
Related Articles
- EP ID EP415837
- DOI 10.32718/nvlvet8828
- Views 87
- Downloads 0
Еритроцитарна система крові гусей в період парування та яйцекладки
Динаміка окремих метаболітів в крові птиці у різні періоди яйцекладки може бути показником підготовки організму до продуктивності та рівня в ньому процесів обміну. Адже, яйцекладка пов’язана з напруженою роботою і функці...
Стан гемопоезу у дійних корів за профілактики мікроелементної недостатності
Наведені результати гематологічних досліджень у дійних корів за профілактики мікроелементної недостатності не-органічними та органічними сполуками дефіцитних мікроелементів. Метою наших досліджень було вивчення впливу не...
ВПЛИВ НАНОКОБАЛЬТУ НА СТАН АНТИОКИСНЮВАЛЬНОЇ СИСТЕМИ ОРГАНІЗМУ ЩУРІВ ЗА ГОСТРОГО ТОКСИКОЛОГІЧНОГО ЕКСПЕРИМЕНТУ
В роботі досліджено вплив наночасток Кобальту в дозовому діапазоні на деякі показники стану антиокиснювальної системи на моделі лабораторних тварин за умов гострого токсикологічного експерименту. З метою визначення біосу...
Безробіття сільської молоді: причини та шляхи вирішення
У статті висвітлено важливість залучення молоді до сільськогосподарського виробництва, а також недопущення масової мі-грації молодих людей за кордон. Зазначено, що це допоможе вирішити низку проблем на селі, таких як реф...
Обмінні процеси жирних кислот загальних ліпідів у рідкому вмісті рубця та продуктивні ознаки корів за наявності в їх раціоні кавового шламу
Біохімічні механізми впливу наявного в раціоні у літній період кавового шламу на обмінні процеси в організмі та проду-ктивні показники корів є маловивченими. Мета роботи полягала в дослідженні обмінних процесів азотовміс...