Клонування послідовності гомологічного crt-кластера в Streptomyces globisporus 1912-бп
Journal Title: Фактори експериментальної еволюції організмів - Year 2018, Vol 22, Issue
Abstract
Мета. Встановити вплив додаткового гомологічного crt-кластера на каротиногенез у клітинах реципієнтного стрептоміцету. Методи. З цією метою було проведено трансформацію гібридною плазмідою pWC 9,6. Плазмідою pWC 9,6, що містила фрагмент послідовності crt-кластера (9576 п. н.) Crt+-мутанту S. globisporus Crt4, трансформували клітини Crt--реципієнта S. globisporus 1912-бп. Для побудови гібридної плазміди фрагменти отриманих ПЛР-копій послідовності crt-кластера мутанта Crt4 клонували в складі човникового вектора pWHM4 (6,6 т. п. н.). Клонування провели за унікальними сайтами рестрикції ендонуклеаз XbaI та HindIII, що знаходяться в полілінкері вектора. Дані рестриктази не мають сайтів рестрикції на послідовності crt‑кластера. Результати. Сконструйовано гібридну плазміду pWC 9,6 (16,2 т. п. н.), яка містить послідовність crt-кластера Crt+-мутанту Crt4 (9576 п. н.). Ця плазміда успішно функціонує в клітинах обох реципієнтів (E. coli XL1 Blue і S. globisporus 1912‑бп) – надає їм стійкості до відповідних антибіотиків. Плазміда pWC 9,6 стабільно зберігає свій молекулярний розмір (16,2 т. п. н.). Однак безперечних доказів експресії crt-кластерів у стрептоміцетних трансформантів не виявлено. Висновки. Сконструйовано плазміду pWC 9,6, що трансформує та стабільно функціонує в клітинах обох реципієнтів (стрептоміцета і E. сoli). Ключові слова: crt-кластер, човниковий вектор, клонування, резистентність, ПЛР.
Authors and Affiliations
В. В. Лук'янчук, Л. В. Поліщук
Keywords
Related Articles
- EP ID EP618785
- DOI -
- Views 45
- Downloads 0
Вплив пренатального стресу на захворюваність та складність перебігу експериментального аутоімунного енцефаломієліту у щурів
Мета. Дослідити вплив пренатального стресу на захворюваність та перебіг експериментального аутоімунного енцефаломієліту (ЕАЕ) у чотиримісячних щурів, нащадків самок з різною чутливістю до індукції ЕАЕ. Методи. Аналізувал...
Полиморфизм в регионе, предшествующем кодирующей области гена Ppd-D1, у Aegilops tauschii Coss.
Цель. Оценить влияние полиморфизмов в регионе, предшествующем кодирующей области гена Ppd-D1, на сроки колошения и цветения в коллекционных образцах Aegilops tauschii Coss., донора генома D мягкой пшеницы. Методы. Выделе...
PTEN-dependent changes of gene expressions in human prostate tumors
Aim. To determine the levels of PTEN relative expression (RE) and the possible effects of its loss on some tumor-associated genes and histological characteristics of human prostate tumors. Methods. PTEN RE and 46 genes w...
Генетический потенциал бактерий, выделенных из загрязненных кадмием почв
Цель. Определение таксономического положения и устойчивости выделенных из загрязненных кадмием почв бактериальных культур к ионам токсичных металлов – Cd2+, Cu2+, Ni2+, Co2+, CrO42-. Методы. Культуры бактерий выделяли ме...
Еволюція екосистем стохастичного і структурного типу
У статті зроблена спроба застосування системного підходу в частині розгляду типів існуючих систем для виявлення специфіки еволюції екосистем різного рівня організації. Концептуальною основою розгляду проблеми специфіки е...