Prokariotyczne systemy ekspresyjne
Journal Title: Advances in Hygiene and Experimental Medicine - Year 2013, Vol 67, Issue 0
Abstract
Do nadprodukcji rekombinowanych białek wykorzystywane są zarówno eukariotyczne, jak i prokariotyczne systemy ekspresyjne. Wybór odpowiedniego systemu zależy m.in. od tempa wzrostu komórek gospodarza i sposobu ich hodowli, poziomu ekspresji genu docelowego oraz obróbki potranslacyjnej syntetyzowanego białka. Niezależnie od rodzaju systemu ekspresyjnego, jego podstawowymi elementami są wektor i gospodarz ekspresyjny.Najczęściej stosowanym układem do nadprodukcji białek, zarówno na skalę laboratoryjną jak i przemysłową, jest system prokariotyczny. System ten oparty jest przede wszystkim na bakteriach E. coli, chociaż coraz częściej wykorzystuje się bakterie z rodzaju Bacillus. System prokariotyczny pozwala na uzyskanie w krótkim czasie dużych ilości rekombinowanych białek. Prosta i tania hodowla komórek bakterii oraz dobrze poznane mechanizmy transkrypcji i translacji ułatwiają zastosowanie tych mikroorganizmów. Łatwość modyfikacji genetycznych i dostępność wielu mutantów bakteryjnych jest dodatkowym atutem systemu prokariotycznego. W pracy scharakteryzowano elementy strukturalne prokariotycznych wektorów ekspresyjnych. Omówiono także strategie przygotowania genu białka docelowego zwiększające wydajność jego produkcji, ułatwiające detekcję oraz oczyszczanie rekombinowanego białka i nadające mu aktywność. Scharakteryzowano szczepy bakteryjne najczęściej wykorzystywane jako komórki gospodarza w systemach ekspresyjnych oraz potencjalne umiejscowienie heterologicznego białka. Znajomość podstawowych elementów prokariotycznego systemu ekspresji pozwala na uzyskanie aktywnych biologicznie białek w krótkim czasie i w satysfakcjonujących ilościach.
Authors and Affiliations
Dorota Porowińska, Magdalena Wujak, Katarzyna Roszek, Michał Komoszyński
Keywords
Related Articles
- EP ID EP66867
- DOI -
- Views 168
- Downloads 0
Mastocytoza – rozpoznawanie i leczenie
Mastocytoza należy do heterogennej grupy rzadko występujących chorób, w których dochodzi do proliferacji i nagromadzenia mastocytów w jednym lub wielu narządach. Najczęściej takich jak skóra, szpik kostny, wątroba, śledz...
Viability and growth promotion of starter and probiotic bacteria in yogurt supplemented with whey protein hydrolysate during refrigerated storage
The effect of whey protein hydrolysate (WPH) addition on growth of standard yoghurt cultures and Bifidobacterium adolescentis during co-fermentation and its viability during storage at 4ºC in yoghurts has been evaluated....
Patient’s perception of the meaning of life in cystic fibrosis – its evaluation with respect to the stage of the disease and treatment
Introduction: Cystic fibrosis (CF) is related to physical and mental barriers. The objective of this work was to evaluate and compare patients’ perception of sense of life in cystic fibrosis in different stages of their...
Pathogenic factors of Pseudomonas aeruginosa – the role of biofilm in pathogenicity and as a target for phage therapy
Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen that can cause several acute and chronic infections in humans, and it has become an important cause of nosocomial infections and antibiotic resistance. Biofilm represen...
Well-known and new variants of pathogenic Escherichia coli as a consequence of the plastic genome
E. coli is a diverse bacterial species encompassing commensal as well as intestinal and extraintestinal pathogenic strains. The ability to adapt to so many different niches in the host organism is determined by the extre...