Test kometowy jako metoda identyfikacji niestabilności chromosomów
Journal Title: Advances in Hygiene and Experimental Medicine - Year 2014, Vol 68, Issue
Abstract
Podstawową metodą analizy stopnia fragmentacji DNA na skutek działania czynników genotoksycznych jest elektroforeza żelowa pojedynczych komórek (single cell gel electrophoresis) nazywana testem kometowym (comet assay). Test kometowy umożliwia analizę kilku różnych modyfikacji DNA, przy stosunkowo niewielkich zmianach w podstawowej procedurze testu. Metoda ta identyfikuje jednoniciowe i dwuniciowe pęknięcia DNA oraz wszelkie modyfikacje chemiczne i enzymatyczne, które mogą się przekształcić w pęknięcia DNA lub chromatyd. Test kometowy daje możliwość detekcji uszkodzeń DNA na poziomie pojedynczej komórki. Mogą nim być analizowane dowolne tkanki, z których uzyskuje się zawiesinę komórkową. Analizowane komórki zatapia się w agarozie na szkiełku mikroskopowym. Po wytrawieniu białek pozostaje DNA. Szkiełko poddaje się elektroforezie i barwi substancją fluorescencyjną. Uzyskuje się obraz w postaci „komet”. „Głowa” to miejsce unieruchomienia komórki przed lizą, „ogon” to uszkodzone fragmenty DNA. Miarą poziomu uszkodzeń DNA jest długość ogona i ilość zawartego w nim DNA. Test kometowy znajduje zastosowanie w badaniach aplikacyjnych w toksykologii genetycznej, monitoringu naprawy DNA po chemio- i radioterapii, ekotoksykologii, żywieniu zwierząt i człowieka, biomonitoringu genotoksyczności, epidemiologii, ocenie materiału deponowanego w bankach nasienia i bankach krwi.
Authors and Affiliations
Magdalena Czubaszek, Małgorzata Szostek, Ewa Wójcik, Katarzyna Andraszek
Keywords
Related Articles
- EP ID EP67393
- DOI -
- Views 169
- Downloads 0
Programmed cell death – strategy for maintenance cellular organisms homeostasis
Programmed cell death (PCD) is a cellular suicide process, commonly found in organisms, that is important for elimination unnecessary and damaged cells during development and adaptation to abiotic and biotic environmenta...
Archaeons – still unknown microorganisms
Archaea is a group of microorganisms described by Carl Woese in 1977. Although Archaea have a similar cellular organization to bacteria, their cell wall and cell membrane are quite unique. Archaeal cell wall lacks peptid...
Receptor GPR120 - mechanizm działania, znaczenie i możliwości zastosowań terapeutycznych
Receptory błonowe sprzężone z białkami G (GPR) tworzą rodzinę transmembranowych białek pośredniczących w licznych, zachodzących w komórce procesach. W ostatnich latach duże zainteresowanie wzbudza należący do tej rodziny...
Overproduction of gastric mucus as a mechanism of stomach’s mucosa protection during energy drinks consumption in Wistar rats
Aim: Energy drinks are the most consumed, socially accepted stimulants in the world. They are drunk by drivers and students, and more often also by adolescents and children. It has been noted that some adverse events are...
Białkowe czynniki lipogenne – rola w regulacji metabolizmu i funkcji mięśnia sercowego
W kardiomiocytach poziom ekspresji enzymów zaangażowanych w lipogenzę jest zaskakująco wysoki, zwłaszcza że synteza de novo lipidów w mięśniu sercowym jest niewielka. Najnowsze badania wykazały, że enzymy te odgrywają is...