Wpływ wielokrotnego, cyklicznego zamrażania i rozmrażania próbki surowicy na poziom przeciwciał klasy IgA, IgG i IgM dla wybranych antygenów bakteryjnych
Journal Title: Medycyna Doświadczalna i Mikrobiologia - Year 2012, Vol 64, Issue 1
Abstract
Introduction. In presented study we investigated the effect of multiple freeze-thaw cycles of human sera on the determination of IgA, IgG and IgM antibodies to selected bacterial antigens. Methods. A panel of 15 serum samples with elevated levels of antibodies to Mycoplasma peumoniae, Yersinia enterocolitica and Salmonella spp. were used (5 positive sera for each pathogen). One set of aliquots designed as the baseline, was taken and stored at 4-8o C for the remainder for the study. The remaining seven sets of aliquots were divided into two parts and repeatedly frozen respectively at two different temperatures: -65oC and -25oC. Once a day the aliquot sets were removed from the freezer and allowed to stand at room temperature for approximately 1 h until completely thawed. For the determination of the level of antibodies the sera after: 2, 5, 10, 15, 20, 25 and 30 freeze/cycle were used. The measurement of IgA, IgG and IgM antibodies was done using a home-made ELISA with four different antigens: whole-cell antigen of M. pneumoniae FH strain, LPS and Yop antigens of Y. enterocolitica serotype O:3 and LPS extracted by Westphal method from Salmonella serogroup B +D. The results were presented as the arithmetic mean of the antibody titre in five sera which were treated by the same number of freeze-thaw cycles. Results. There was no significant statistic difference between levels of antibodies in unfrozen and frozen sera even after 30 freeze-thaw cycles. Depending of the antigen used in ELISA a slight varations in the level of antibodies were observed but the changes were small and not clinically significant. Examination of the ELISA values does not suggest any consistent nonlinear trend in levels of IgA, IgG and IgM antibodies in sera frozen at -65o C as well at -25o C. Conclusions. Our study demonstrates that the IgA, IgG and IgM antibody activity levels measured for M. pneumoniae, Y. enterocolitica and Salmonella antigens are stable even after 30 freeze-thaw cycles. Oceniono wpływ wielokrotnego, cyklicznego zamrażania i rozmrażania próbki surowicy na poziom przeciwciał klasy IgA, IgG i IgM dla antygenów M. pneumoniae, Yersinia enterocolitica i Salmonella sp. Uzyskane wyniki wykazały, że nawet 30-krotne zamrożenie i rozmrożenie próbki surowicy nie ma istotnego wpływu na poziom przeciwciał dla wybranych lipopolisacharydowych i białkowych antygenów bakteryjnych.
Authors and Affiliations
Waldemar Rastawicki, Karolina Śmietańska, Natalia Rokosz, Marek Jagielski
Keywords
Related Articles
- EP ID EP75323
- DOI -
- Views 125
- Downloads 0
Wpływ nanocząstek na aktywność ludzkich neutrofili: analiza zdolności wytwarzania rodników tlenowych w obecności nanohydrokoloidów Ag i Cu
Rosnąca skala praktycznego użycia nanocząstek srebra i miedzi, a zwłaszcza perspektywa wykorzystania tych nanostruktur do stosowania wewnątrzustrojowego, skłoniły nas do zbadania wpływu nanokoloidów Ag i Cu na potencjał...
Przeszczep jelitowej flory bakteryjnej w leczeniu choroby związanej z Clostridium difficile Intestinal microbiota transplantation for the treatment of Clostridium difficile infection
Zakażenia C. difficile będące często przyczyną biegunek poantybiotykowych czy rzekomobłoniastego zapalenia jelit stanowią narastający problem zdrowotny. Rosnąca liczba przypadków zachorowań na CZCD (choroba związana z C....
Ocena przydatności wybranych antygenów Mycoplasma pneumoniae do serodiagnostyki mykoplazmozy
Oceniono przydatność wybranych antygenów białkowych, lipoproteinowych i glikolipidowych M. pneumoniae do serodiagnostyki mykoplazmozy. Wykazano, że najczęściej w próbkach surowicy osób z mykoplazmozą wykrywane są przeciw...
Opracowanie wydajnych procedur izolacji DNA Cryptosporidium sp. i Trichinella spiralis z próbek kału
Celem przeprowadzonych badań było opracowanie procedury izolacji DNA Cryptosporidum sp. i Trichinella spiralis z próbek kału. DNA izolowano z kału zawierającego eksperymentalnie dodane larwy włośnia krętego lub oocysty C...
Identyfikacja 20 nowych rejonów zmiennych w genomach Staphylococcus aureus przydatnych do genotypowania koagulazo-dodatnich gronkowców Identification of 20 new variable regions in the genomes of Staphylococcus aureus useful for genotyping coagulase-positive staphylococci
W pracy zidentyfikowano 20 nowych rejonów zmiennych w genomach gronkowca złocistego przydatnych do badań epidemiologicznych metodą PCR. Teoretyczna analiza 35 genomów metodą PCR z udziałem 20 nowych regionów zmiennych po...