Wpływ wybranych czynników przedanalitycznych na wyniki oznaczeń wirusowego DNA metodą PCR
Journal Title: Medycyna Doświadczalna i Mikrobiologia - Year 2012, Vol 64, Issue 2
Abstract
Introduction: Obtaining a reliable laboratory test result depends on many factors, among which preanalytical factors play a significant role. The aim of this study was to determine the effect of temperature, storage time of samples and number of freezing and thawing cycles on the results of tests carried out by PCR. Methods: The study was conducted in a model of cytomegalovirus (DNA) and with four types of clinical material: whole blood, serum, cerebrospinal fluid, urine and archival samples. After contamination with CMV clinical samples were incubated under various conditions for a specified period of time or subjected to cycles of freezing and thawing. The presence of DNA - CMV were determined by nested PCR method. Results: The results revealed that in the case of applied levels of contamination and in model used in the study: 1) CMV DNA in samples of clinical material (blood, serum, cerebrospinal fluid, urine) for testing by PCR remains stable for at least 5 days at room temperature or refrigerated and at least 7 days when frozen, 2) Repeated freezing and thawing clinical specimens has no influence on the result of the presence of viral DNA, 3) Isolated viral DNA is stable in the temperature of the freezer and can be subjected to at least 20 freeze-thaw cycles without affecting the PCR results. Conclusions: Viral DNA in clinical specimens examined in the applied experimental conditions is stable. Określono wpływ temperatury, czasu przechowywania próbek różnych materiałów klinicznych oraz liczby cykli zamrażania i rozmrażania na wyniki oznaczeń przeprowadzonych metodą PCR. Badania przeprowadzono na modelu wirusa cytomegalii (DNA).
Authors and Affiliations
Agnieszka Trzcińska, Anna Laskowska, Irena Brodzka, Joanna Siennicka
Keywords
Related Articles
- EP ID EP75357
- DOI -
- Views 120
- Downloads 0
Wspomnienia ze 100 lat historii laboratorium bakteriologicznego w Państwowym Zakładzie Higieny. Jego pracownicy oraz rola jaką odegrali w opanowywaniu epidemii i w ochronie zdrowia ludności Polski
Artykuł zawiera wybrane informacje o ludziach oraz ich działaniach związanych z prowadzonymi w PZH już od 100 lat badaniami bakteriologicznymi. Opisano wyzwania jakie w owym czasie były niezbędne dla ochrony ludności pr...
Chorobotwórczość Aggregatibacter actinomycetemcomitans w świetle ostatnich badań
Aggregatibacter actinomycetemcomitans jest bakterią powszechnie wiązaną z agresywnym zapaleniem przyzębia. W pracy omówiono serotypy patogenu i potencjalne mechanizmy odpowiedzialne za przyspieszone niszczenie tkanek prz...
Dobór jednorazowych środków ochrony osobistej do pracy z materiałem zawierającym wysoce niebezpieczne patogeny Selection of disposable personal protective equipment for work with samples containing highly pathogenic microorganisms
Pojawiające się w ostatnim czasie zagrożenia, takie jak m.in. SARS, Ebola, MERS-CoV, wąglik, coraz częściej zmuszają do rozważenia, jak skutecznie ochronić pracowników laboratoriów diagnostycznych przed zakażeniem niebez...
Ocena przydatności opracowanego we własnym zakresie lateksowego testu aglutynacyjnego do poszukiwania przeciwciał dla antygenów pałeczek Yersinia enterocolitica i Yersinia pseudotuberculosis u osób z jersiniozą Development and evaluation of a latex agglutination test for the detection of antibodies to Yersinia enterocolitica and Yersinia pseudotuberculosis in humans with yersiniosis
Oceniono przydatność opracowanego we własnym zakresie lateksowego testu aglutynacyjnego do poszukiwania przeciwciał dla antygenów pałeczek Yersinia enterocolitica i Yersinia pseudotuberculosis w surowicy osób z jersinioz...
Ocena wiarygodności poziomu przeciwciał przyjmowanego za diagnostycznie znamienny w serodiagnostyce krztuśca wykonywanej odczynem ELISA
Przeanalizowano wiarygodność diagnostycznie znamiennego poziomu przeciwciał klasy IgA i IgG (wartość cut off) przyjętego w komercyjnych zestawach ELISA firmy NovaTec i Virotech do serodiagnostyki krztuśca. Wykazano, że o...