Zastosowanie metody Real-time PCR opartej na wykorzystaniu nukleolitycznych sond typu TaqMan do wykrywania markera wirulencji Bacillus anthracis – genu pag oraz specyficznej sekwencji chromosomalnej rpoB
Journal Title: Postępy Nauk Medycznych - Year 2011, Vol 24, Issue 10
Abstract
Przedmiotem pracy było zastosowanie metody Real-time PCR opartej na wykorzystaniu nukleolitycznych sond typuTaqMan do wykrywania markera wirulencji Bacillus anthracis – genu pag oraz specyficznej sekwencji chromosomalnej rpoB. Opracowano również reakcję multiplex Real-time PCR pozwalającą na równoczesną amplifikację i wykrywanie wymienionego genu oraz specyficznej sekwencji chromosomalnej.Badania przeprowadzono z użyciem jednego szczepu szczepionkowego i czterech szczepów terenowych laseczki wąglika. Przy ocenie swoistości testów wykorzystano izolaty różnych gatunków rodzaju Bacillus oraz szczepy sześciu innych gatunków drobnoustrojów. Do badań użyto zestaw do PCR QuantiTect (Qiagen) oraz startery swoiste dla genu pag kodującego białko PA i startery do amplifikacji fragmentu specyficznego dla sekwencji chromosomalnej.Reakcja PCR pozwoliła na wykrycie badanych genów na podstawie obserwacji krzywej amplifikacji. Czułość i liniowość reakcji określono korzystając ze współczynnika regresji. Wykazano wysoki współczynnik regresji wynoszący 0,99 dla wszystkich reakcji.Testy Real-time charakteryzowały się wysoką czułością i specyficznością.
Authors and Affiliations
Sylwia Budniak, Agnieszka Kędrak-Jabłońska, Monika Reksa, Anna Szczawińska, Marek Krupa
Keywords
Related Articles
- EP ID EP54054
- DOI -
- Views 159
- Downloads 0
Hereditary breast and ovarian cancer
Familial breast cancer was first recognized in the Roman medical literature of 100 AD (1). The first documentation of familial clustering of breast cancer in modern times was published by Broca, who reported 10 cases of...
Epidemiologia zaburzeń otępiennych w Polsce – przegląd badań
Wstęp. Celem pracy było określenie dostępności i spójności wyników badań epidemiologicznych dotyczących rozpowszechnienia zaburzeń poznawczych i otępień w Polsce.Materiał i metody. Dokonano przeglądu literatury dotyczące...
Chemical lumbar sympathectomy (ChLS) in treatment of the lower limbs’ ischaemia – 15 years experience
The results critical limb ischaemia with the chemical or classical lumbar symphatectomy remain controversial. Nevertheless those procedures are still performed.The aim of the study was present 15 years of personal experi...
Polska nefrologia- jeszcze Kopciuszek czy już Królewna?
Nefrologia stanowi jedną z dziedzin medycyny powstałej z interny w latach sześćdziesiątych I siedemdziesiątych ubiegłego stulecia. Celem obecnego opracowania jest ocena pozycji naukowej polskiej nefrologii. Dzięki przepr...
The role of cervical smear in cervical cancer diagnosing
Cervical cancer is the second most common malignant cancer in females worldwide. It is well-established that Human Papillomavirus (HPV) infections play a critical role in the development of cervical cancer. However, a la...