Aktywność izoenzymów A i B N-acetylo-β-heksozoaminidazy w tkance raka nerki
Journal Title: Współczesna Onkologia - Year 2006, Vol 10, Issue 10
Abstract
W Polsce rak nerki stanowi 3–4% wszystkich nowotworów złośliwych. W niszczeniu tkanki nerkowej przez nowotwór biorą udział między innymi lizosomalne glikozydazy, które degradują łańcuchy oligosacharydowe glikokoniugatów (glikoprotein, proteoglikanów i glikolipidów). N-acetylo-β-D-heksozoaminidaza (E.C.3.2.1.52) (HEX) jest kwaśną egzoglikozydazą lizosomalną odszczepiającą reszty N-acetyloglukozoaminy (GlcNAc) lub N-acetylogalaktozoaminy (GalNAc) z nieredukującego końca łańcuchów oligosacharydowych glikokoniugatów. HEX jest glikoproteiną zbudowaną z łańcuchów polipeptydowych α i β. Łańcuchy te występują parami, w trzech możliwych kombinacjach. Wyróżnia się, zatem trzy izoenzymy HEX: izoenzym A-αβ, izoenzym B-ββ oraz izoenzym S-aa. W tkankach najwyższą aktywność wykazują izoenzymy A i B, jednak stosunek ilościowy izoenzymów A/B w każdej z tkanek jest różny. W naturalnych oligosacharydach HEX hydrolizuje wiązania β-glikozydowe N-acetyloheksozoamin z innymi cukrami. Enzym ten również działa na drobnocząsteczkowe sztuczne substraty, takie jak pochodne p-nitrofenolu i metyloumbelliferonu. Do wykrywania aktywności izoenzymów A i B z guza nerki i tkanki otaczającej guza w żelach poliakryloamidowych po izoelektroogniskowaniu wykorzystaliśmy α-naphtyl-AS-BI-N-acetyl-β-glucosaminide jako substrat. Elektroogniskowanie jest metodą rozdziału elektroforetycznego białek, która wykorzystuje wędrówkę cząstek w gradiencie pH wytworzonym po przyłożeniu pola elektrycznego do mieszaniny amfolitów wprowadzonej do żelu poliakryloamidowego. Celem pracy było oznaczenie ilościowe aktywności izoenzymów N-acetylo-β-D-heksozoaminidazy dwiema metodami: kolorymetryczną i elektroforetyczną, przy użyciu dwóch różnych substratów. Materiał badany stanowiły fragmenty nerek, pobrane podczas operacji od 30 pacjentów obu płci, z rozpoznanym rakiem nerki. Wyniki: W tkance nerkowej, zarówno zdrowej, jak i nowotworowej, znamiennie wyższą aktywność specyficzną oznaczaną obydwoma metodami miał izoenzym A N-acetylo-β-heksozoaminidazy, w porównaniu ze specyficzną aktywnością izoenzymu B. Wnioski: Oznaczanie aktywności izoenzymów HEX metodą kolorymetryczną może być uznane za cenny marker diagnostyczny chorób nerek, gdyż daje wyniki zgodne z technicznie trudniejszą i bardziej kosztowną metodą opartą na elektroogniskowaniu.
Authors and Affiliations
Małgorzata Borzym-Kluczyk, Ewa Olszewska, Sławomir Szajda, Barbara Darewicz, Krzysztof Zwierz
Keywords
Related Articles
- EP ID EP154678
- DOI -
- Views 64
- Downloads 0
Informacje prasowe a rzeczywiste możliwości poradnictwa genetycznego w aspekcie psychoonkologicznym
Rak piersi jest najczęstszym w Polsce nowotworem złośliwym u kobiet. W ostatnim czasie, przy stałym wzroście zachorowalności, nie obserwuje się wzrostu umieralności. Ten pozytywny trend wiąże się m.in. z wcześniejszym...
The transbronchical ultrasound in diagnostics of respiratory diseases
Transbronchial ultrasound (TBUS) is an invasive technique, which is complementary to fiberoptic bronchoscopy and computed tomography in the diagnostics of chest diseases. During more than ten years of TBUS evolution, the...
Wpływ promieniowania jonizującego na DNA komórki
Promieniowanie jonizujące stosowane w radioterapii nowotworów powoduje szereg uszkodzeń materiału genetycznego Może oddziaływać bezpośrednio z cząsteczką DNA wywołując jonizację zasad – jest to tzw efekt bezpośredni lub...
Wznowa biochemiczna po radioterapii raka stercza
Wznowa biochemiczna 5 lat po teleradioterapii lub brachyterapii występuje u 5–20 proc. pacjentów z I grupy prognostycznej oraz u 30–60 proc. chorych z II i III grupy prognostycznej. Wyniki napromieniania oceniane są na p...
Epigenetic regulation of transcription factor STAT3 activity in cancer cells
The transcription factor STAT3 is increasingly viewed as an oncogene. Activated STAT3 is pro-proliferative, anti-apoptotic and oncogenic. There is growing evidence for the epigenetic regulation of STAT3 activity in can...