Analysis of effectiveness of the Cre/loxp site-specific recombinase system through subsequent generations of Arabidopsis thaliana transformants
Journal Title: Вісник Українського товариства генетиків і селекціонерів - Year 2015, Vol 13, Issue 1
Abstract
Aim. The aim of the work was to analyze the effectiveness of the Cre/loxP site-specific recombinase system through subsequent generations of Arabidopsis thaliana transformants. Methods. The increase in the number of marker-free Arabidopsis thaliana transformants was studied through several subsequent generations. Genetic transformation of plants was carried out using the Cre/loxP site-specific recombinase system under the control of 35S promoter. For this purpose two types of DNA constructs were designed that contain the marker gene gus and the recombinase gene cre flanked by loxP sites. Hygromycin resistance gene hptII in both constructs was moved out of the loxP sites, and in the case of excision event it remained in plant genome. The selection of transformants was performed on Murashige and Scoog medium with hygromycine (100 mg/l). The recombinase-mediated excision event of marker genes in genome was determined by histochemical analysis and molecular genetic analysis of three subsequent generations of transformants. Results. The number of marker-free transformants was increased with each subsequent generation for both types of DNA-constructs. Moreover, the reduction in the total amount of integrated T-DNA per genome to a minimum was identified by molecular-genetic analysis that indicates the ability of the Cre/loxP site-specific recombinase system to control the number of the integration events in plant genome. Conclusions. The developed approach is simple in usage and effective tool for obtaining marker-free transformed plants.Keуwords: selective marker genes, removal of marker genes, site-specific recombinase.
Authors and Affiliations
A. S. Sekan
Keywords
Related Articles
- EP ID EP613850
- DOI -
- Views 69
- Downloads 0
Дія астаксантину на рівень радіаційно-індукованих аберацій хромосом в лімфоцитах периферичної крові людини іn vitro
Мета. Мета досліджень – встановлення можливості модифікації астаксантином (каротиноїд з групи ксантофілів) радіаційно-індукованого цитогенетичного ефекту в лімфоцитах периферичної крові (ЛПК) людини in vitro. Методи. Кул...
Професор Ю.П.Мірюта — педагог і вчений (закінчення)
Юрій Петрович Мірюта зіграв велику роль у справі захисту й пропаганди розвитку ідей М. І. Вавилова. Він протягом усього творчого свого життя вів постійну боротьбу з лисенківщиною, відстоював правильне розуміння ідей гені...
Nucleotide sequences of tRNA-methonine genes of Streptomyces globisporus 1912-2, identified in silico
Aim of this work was to identify nucleotide sequences of tRNAMet of S. globisporus 1912-2. Methods. Resources of server NCBI (programs BLAST: blast, discontiguous megablast and databases: “Genome”, “Nucleotide”) were use...
X International conference “Factors in experimental evolution of organisms”. Information letter № 2
Ідентифікація аллелів самонесумісності у сортів черешні (Prunus avium L.) української селекції
Мета. Українськими селекціонерами створено велику кількість сортів черешні, які все ще за лишаються майже недослідженими на молекулярно-генетичному рівні. Метою роботи було провести ідентифікацію алелів самонесумісності...