Патогенетические механизмы возникновения ревматоидного артрита и анкилозирующего спондилита за участием активизационно-энзиматических и фенотипических особенностей лимфоцитов
Journal Title: Lviv Clinical Bulletin - Year 2018, Vol 3, Issue 23
Abstract
Значительная распространенность воспалительных заболеваний суставов, тенденция к неуклонному нарастанию их тяжести, высокие показатели в результате этого временной потере трудоспособности и инвалидности, особенно лиц среднего трудоспособного возраста, определяют важное медико-социальное значение этих болезней. На современном этапе РА и АС рассматриваются как заболевание, в основе которых лежат иммунные нарушения. Известно, что лимфоциты крови являются ключевыми клетками иммунной системы, которые играют ведущую роль в обеспечении компенсаторно-приспособительных реакций организма. Разнообразие висцеральных проявлений воспалительных заболеваний заболеваний свидетельствует об участии универсальных механизмов реализации системного патолоґичного процесса с участием полипотентных мессенджеров, которые обладают мультифункциональными эффектами. К таким универсальным мессенджерам принадлежат оксид азота (NO), ионы кальция Са2+ (Са2+), которые прямо или косвенно регулируют различные физиолого-биохимические процессы. Исследования последних десятилетий в области биохимии и физиологии свидетельствуют, что прецизионный контроль (NO) и (Са2+) обеспечивается функционирование ферментативных систем клетки. Среди последних ведущая роль в поддержании NO- и ионного гомеостаза клетки принадлежит NO-синтазе, аргиназе и АТФ-азам. Однако, несмотря на значительное количество работ, посвященных изучению энзиматического спектра лимфоцитов, исследования функциональной активности их аргиназо-NO-синтазного и АТФ-азных систем крайне ограничены, а патофизиологические и иммунные механизмы их дисфункции - невыясненными. Цель. Выяснить патофизиологические механизмы возникновения ревматоидного артрита и анкилозирующего спондилита с участием аргиназо-NO-синтазного и АТФ-гидролазних систем лимфоцитов крови и клеточного звена иммунитета. Материалы и методы. После получения письменного согласия на проведение комплексного обследования в соответствии с принципами Хельсинкской декларации прав человека, Конвенции Совета Европы о правах человека и биомедицине и соответствующих законов Украины, а также комплексного клинико-лабораторного и инструментального обследования всех органов и систем в соответствии с требованиями современной медицины в рандомизированный способ привлечено в исследование 86 больных (48 женщин (56,0%) и 38 мужчин (44,0%) в возрасте от 18 до 56 лет), находившихся на стационарном лечении в ревматологическом отделении КЗ ЛОР "Львовская областная клиническая больница" в 2012-2015гг. с предыдущей стратификацией при наличии у 50 больных РА (39 женщин (78,0%) и 11 мужчин (22,0%) в возрасте от 18 до 56 лет, с результатах обследований «Ревматоидный артрит: полиартрит; сероположительный вариант, anti-CCP (+ ) хроническое течение, с поражением мелких суставов кистей, стоп, луче-запястных, коленных суставов. Rtg II стадии; ФНС II степени») и у 36 больных АС (9 женщин (25,0%), 27 мужчин (75 0%) с результатах обследований «Анкилозирующий спондилит: акт. II степени; центральная форма, хроническое течение, с поражением илеосакральных соединений, тазобедренных, плечевых суставов, шейного отдела позвонка; Rtg ІІ стадия; ФНС II степени») Моноядерные лимфоциты периферической крови человека выделяли из гепаринизированной свежополучаемой крови в ґрадиенте плотности фикол-триумбраста [11]. Жизнеспособность лимфоцитов, которая во всех опытах составляла не менее 95,0%, оценивали по окраске трипановым синим. Для пермеабилизации мембран лимфоцитов крови и раскрытия латентных ферментативных активностей к суспензии лимфоцитов добавляли 0,1-0,3% сапонина. Количественное определение популяций и субпопуляций лимфоцитов определяли методом непрямой иммунофлуоресцентной реакции с моноклональными антителами к дифференцирующим антигенам поверхности клетки. Определение фагоцитарной активности нейтрофилов по поглощающей способности проводили на основе метода, основанного на эндоцитозе фагоцитами частиц латекса, виализирующего в цитоплазме клеток в виде круглых гранул синего цвета. Активность NO-синтазы определяли по специфическому расщеплению NADPH(H+). Активность арґиназы лимфоцитов крови определяли по образованию мочевины. Са2+, Мg2+ - и Na+, K+-ATФазную активность лимфоцитов крови определяли спектрофотометрически, регистрируя процесс гидролиза АТФ накоплением Рі. Содержание протеина в лимфоцитарной смеси определяли по модифицированному методу А. Лоури. Результаты исследований. В результате проведенных исследований выявлены изменения активности аргиназо-NO-синтазной системы лимфоцитов крови, нарушение функциональной активности клеток фагоцитарной системы и изменение соотношений субпопуляций Т-лимфоцитов у пациентов с воспалительными заболеваниями суставов. Рост активности iNOS у этих пациентов сопровождается компенсаторным ингибированием активности эндотелиальной изоформы NOS. Значительная активация iNOS активности ведет к избыточному образованию NO в лимфоцитах крови. NO в высоких концентрациях инициирует процессы оксидативного и нитрозивного стресса, которые ведут к нарушению прооксидантно-антиоксидантного равновесия. В результате этого происходит активация апоптичних механизмов и инициация деструктивных процессов в клетках, ведет к нарастанию дисфункции. В то же время, подавление активности ATФазних систем свидетельствует о перегрузке цитозоля лимфоцитов ионами Na+ и Ca2+ и нарушения ионного гомеостаза, способствует возникновению клеточных нарушений. Выводы. У больных ревматоидным артритом в результате уменьшенного количества Т-цитотоксических лимфоцитов достоверно увеличивается количество Т-хелперов, натуральных киллерных клеток, активированных и регуляторных Т-лимфоцитов, клеток с супрессивной активацией, что указывает на активацию клеточного звена аутоагресии с включением регуляторных механизмов, а у больных анкилозирующим спондилитом - активация натуральных киллерных клеток, активированных Т-лимфоцитов, лимфоцитов с супрессивной активацией и снижение числа регуляторных лимфоцитов, что указывает на усиление им иммунологического воспалительного процесса. Более выраженные изменения хелперно-цитотоксических (CD4+ и CD8+), активированных (CD3+/CDHLA-DR+), супресивных (CD4-/CD25+) Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов (CD19+), регуляторных клеток (CD4+/CD25+) верифицированы у больных ревматоидный артрит, по сравнению с больными анкилозирующим спондилитом, что свидетельствует о наличии более мощной иммунозависимой аутоагресии у больных ревматоидным артритом. Нарушение клеточного звена иммунитета сопровождается угнетением активности эндотелиальной NO-синтазы лимфоцитов крови пациентов с ревматоидным артритом на 34,9±7,8% (р<0,05), у пациентов с анкилозирующим спондилитом - на 43,4±6,2% (р <0,001) по сравнению с практически здоровыми лицами с одновременной активацией ее индуцибельной изоформы. Активность арґиназы лимфоцитов крови пациентов с ревматоидным артритом увеличивается на 178,3±22,3% (р<0,001), с анкилозирующим спондилитом - на 272,6±30,2% (р<0,001) по сравнению с практически здоровыми лицами. Нарушение синтеза NO сопровождалось угнетением активности Ca2+,Mg2+ - АТФазы плазматической мембраны лимфоцитов крови пациентов с РА на 46,8±5,7% (р<0,001), у пациентов с АС - на 39,4±6,4% (р < 0,001), активности Ca2+,Mg2+ -АТФазы мембран ЭПР лимфоцитов крови пациентов с обеими патологиями на 35,6±4,8% (р<0,001) и 20,0±3,8% (р<0,001) соответственно; активности Na+,K+-АТФазы лимфоцитов крови пациентов с обеими патологиями на 42,8±7,2% (р<0,001) и 39,7±6,5% (р<0,001) соответственно по сравнению с практически здоровыми лицами. Изменения активностей аргиназо-NO-синтазной и АТФазной систем лимфоцитов крови у пациентов с ревматоидным артритом более выражены, чем с анкилозирующим спондилитом, однако чувствительным параметром является активность iNOS, что свидетельствует об определяющей роли нарушений в этой регуляторной системе для формирования и нарастания воспалительного поражения суставов.
Authors and Affiliations
N. Lychkovska, V. Chopyak, Z. Vorobets
Keywords
Related Articles
- EP ID EP408274
- DOI 10.25040/lkv2018.03.034
- Views 141
- Downloads 0
Efficacy of Itopride in Treatment of Gastroparesis Considering the State of Carbohydrate Metabolism in Patients with Type 2 Diabetes Mellitus
Introduction. Diabetes mellitus (DM) is considered to be one of the most serious problems in internal medicine due to multiple organ lesions and irreversible changes in the functioning of the organism. At present, despit...
Современный взгляд на дилятационную кардиомиопатию
Введение. Дилятационная кардиомиопатия (ДКМП) - тяжелое хроническое заболевание, возникающее в результате различных состояний, которые приводят к дилатации желудочков, вследствие чего снижается их сократительная способно...
Methodology of the Teaching of Subject “Tuberculosis” to Students with the English-language Form of Education on the Basis of Application of Computer and Information Technologies
Introduction. At the stage of the unceasing progress of science and technology, the quality of education, and hence the use of innovative technologies, makes it possible to improve it. In the educational sector of Ukrain...
Atrial Fibrillation in Patients after Myocardial Infarction: Association with Changes in Heart Structure, Heart Failure and Age
Introduction. Atrial fibrillation (AF) occurs in 8.0-22.0% of patients with acute myocardial infarction (MI). It is associated with a significant increase in both hospital mortality and mortality over a 5-year observatio...
Ефективність лікування хворих на пептичну виразку дванадцятипалої кишки у Львівській області (ретроспективний аналіз)
Вступ. Поширеність інфекції H. Pylori знижувалася в останні роки. Проте процеси міґрації населення нівелюють цю різницю, а зниження темпів поширення Н. pylori останнім часом сповільнюється. Крім цього, частота невдалої е...