Activity of isoenzymes A and B of N-acetyl-β-glucosaminidase in renal cancer tissue
Journal Title: Współczesna Onkologia - Year 2006, Vol 10, Issue 10
Abstract
In Poland, renal cancer makes up 3-4% of all malignant tumours. Lysosomal glycosidases take part in renal tissue destruction. The exoglycosidases degrade the oligosaccharide chains of glycoconjugates (glycoproteins, proteoglycans and glycolipids). N-acetyl-β-glucosaminidase (E.C.3.2.1.52) (HEX) is an acid lysosomal exoglycosidase which releases N-acetylglucosamine (GlcNAc) and N-acetylgalactosamine (GalNAc) residues from the non-reducing ends of oligosaccharide chains of glycoconjugates (glycoproteins, glycolipids, proteoglycans). HEX is a glycoprotein composed of two polypeptide chains a and β. The chains are present in pairs in three possible combinations: isoenzyme A-αβ, isoenzyme B-ββ and isoenzyme S-αα. Isoenzymes A and B demonstrate the highest activity in the tissues; however, the ratio of isoenzymes A/B is different in various tissues. In the natural oligosaccharides, HEX hydrolyzes the b glycoside bond of N-acetylhexosamine with other sugars. The enzyme reacts with artificial substrates such as derivatives of hexosamines with p-nitrophenol and umbelliferone. To determine the activity of isoenzymes A and B in renal tumour and neighbouring macroscopically normal renal tissue in polyacrylamide gel after isoelectrofocusing, we used a-naphtyl-AS- -BI-N-acetyl-b-glucosaminide as a substrate. Electrofocusing is an electrophoretic method of protein separation in polyacrylamide gel which uses the migration of molecules in a pH gradient that is formed after applying an electric field to an ampholyte mixture. The aim of the study was quantitative determination of N-acetyl-β-D hexosaminidase isoenzymes activity by using two methods: colorimetric and electrophoretic and two different substrates. Materials: Renal specimens harvested from 30 patients during surgery due to renal cancer were used for the study. Results: In cancerous and normal human renal tissues, isoenzyme A of N-acetyl-b-D hexosaminidase showed statistically higher specific activity, in comparison to isoenzyme B, after determination of both isoenzymes by two different methods. Conclusion: Determination of HEX isoenzyme activity using the colorimetric method may be considered as a valuable diagnostic marker in renal diseases. The results of HEX isoenzyme activity determination by colorimetric and electrophoretic method are compatible, although for routine determinations the colorimetric method is recommended as the electrofocusing is more technically difficult and more expensive than the colorimetric one.
Authors and Affiliations
Małgorzata Borzym-Kluczyk, Ewa Olszewska, Sławomir Szajda, Barbara Darewicz, Krzysztof Zwierz
Keywords
Related Articles
- EP ID EP102035
- DOI -
- Views 46
- Downloads 0
Aktywność N-acetylo-β-heksozoaminidazy i jej izoenzymów w tkance nerki, w surowicy krwi i w moczu pacjentów z rakiem nerki
W Polsce nowotwór nerki, obejmujący 3–4 proc. wszystkich nowotworów złośliwych, stanowi trudny problem diagnostyczny. Rak nerki (najczęstszy nowotwór nerki u dorosłych) jest zwykle diagnozowany, gdy wystąpiły odległe prz...
Wczesne wyniki leczenia raka gruczołu piersiowego metodą oszczędzającą
Wstęp: Rocznie notuje się 10 tys. nowych zachorowań na raka piersi. Operacje oszczędzające wykonywane są u ok. 5 proc. chorych w Polsce i 50–70 proc. chorych w Europie Zachodniej. Jest to poważny problem społeczny, gd...
Guzy okolicy oczodołowej – wybrane problemy diagnostyczne i terapeutyczne
Lokalizacja nowotworu złośliwego w obrębie lub sąsiedztwie oczodołu jest wyjątkowo niekorzystna dla chorego. Obok problemów onkologicznych pojawiają się trudności okulistyczne, neurochirurgiczne – związane z bliskim sąsi...
Zastosowanie połączenia pozytonowej tomografii emisyjnej z tomografią komputerową w rozpoznaniu wznowy i ocenie leczenia imatinibem nowotworu podścieliskowego przewodu pokarmowego – opis przypadku
Połączenie pozytonowej tomografii emisyjnej (positron emission tomography – PET) z tomografią komputerową (computed tomography – CT) (PET/CT) z użyciem F-18-fluorodeoksyglukozy (FDG) należy do najnowszych metod obrazow...
XXI Zjazd Polskiego Towarzystwa Hematologów i Transfuzjologów, Wisła, 8–10.09.2005 r. Sesja satelitarna pt. Przeszczepianie krwiotwórczych komórek macierzystych w terapii guzów litych. Fakt czy fikcja?