ПЛР-тест для ідентифікації та видової диференціації Waddlia chondrophila
Journal Title: Науковий вісник Львівського національного університету ветеринарної медицини та біотехнологій імені С.З. Гжицького - Year 2019, Vol 21, Issue 93
Abstract
Останнім часом кількість видів хламідій, пов’язаних з рядом запальних захворювань тварин, значно розшилась. Більш того, окрім хламідій, увагу привернули хламідіє-подібні організми, які не тільки є небезпечними для тварин, але й несуть зоонозну загро-зу. Найбільш вивченими, на даний момент хламідіє-спорідненими організмами є Waddlia chondrophila та Parachlamydia acan-thamoebae, їх пов’язують з захворюваннями репродуктивної та респіраторної систем великої рогатої худоби та людини. З огляду на небезпечність для тварин і зоонозну загрозу хламідіє-подібних організмів та відсутністю доступного способу їх дослідження метою нашої роботи стало розроблення ПЛР – тесту для ідентифікації і видової диференціації Waddlia chondrophila. При розробці ПЛР – тест система для виявлення Waddlia chondrophila в якості генів-мішеней були обрані консервативні гени 16S pРНК. Праймери підбиралися таким чином, щоб була можливість створення мультиплексних поєднань з раніше розробленою нами ПЛР-тест-системою з Parachlamydia acanthamoebae. Ці праймери були розроблені з однаковими фізичними характеристи-ками, щоб мати можливість забезпечити одночасну ампліфікацію в однакових умовах в одиночних або мультиплексних ПЛР. Для оцінки специфічності праймерів використовувалася панель зразків ДНК: Waddlia chondrophila, Parachlamydia acanthamoebae, Chlamydia avium, Chlamydia pecorum, Chlamydia abortus, Chlamydia psittaci, Chlamydia suis, Chlamydia caviae, Clavochlamydia salmonicola, Piscichlamydia salmonis. Праймери давали продукт ПЛР 123 пари нуклеотидів (п.н.) тільки тоді, коли у зразку була присутня контрольна ДНК Waddlia chondrophila, як і очікувалося. Незначний розмір ПЛР-продукту теоретично дозволяє викорис-товувати дану пару олігонуклеотидних праймерів і для ПЛР-тестів в реальному часі. Розроблена ПЛР тест-система для ідентифікації та видової диференціації Waddlia chondrophila після апробації на клінічному матеріалі може бути використана вченими для широкого моніторингу, використовуватись лікарями ветеринарної медицини для уточнення діагнозу, бути введеними в практику лабораторій ветеринарної медицини та гуманної медицини.
Authors and Affiliations
В. К. Зезекало, С. Б. Передера, Т. В. Буслик, К. Ф. Почерняєв
Keywords
Related Articles
- EP ID EP593762
- DOI 10.32718/nvlvet9325
- Views 86
- Downloads 0
Молочна продуктивність та обмінні процеси в організмі корів за використання в структурі раціону препарату «Biosprint»
В останні роки значна частина молока виробляється в господарствах різних організаційних форм господарювання пе-реважно на кормах власного виробництва. При цьому виникає ряд проблем від вирішення яких залежить кількість,...
Прилад для дослідження структурно-механічних та теплофізичних властивостей м’яса птиці
У статті описано конструкцію та принцип роботи вимірювального модуля для визначення структурно-механічних властиво-стей та теплопровідності м’яса птиці до та після кулінарної обробки. Наведено схему розташування температ...
Вплив кадмієвого навантаження на морфологічні показники крові птиці
У статті наведено результати досліджень впливу сульфату кадмію у різних дозах на організм птиці. Метою роботи було з’ясували вплив кадмію сульфату у дозах 2 і 4 мг/кг маси тіла на морфологічні показники крові курей-несуч...
Особливості морфометричної будови імаго Oesophagostomum venulosum (Rudolphi, 1809)
Вивчення біологічного різноманіття, морфологічних та біологічних особливостей збудників інвазійних захворювань тварин в природних та антропогенно-трансформованих екосистемах є важливим завданням сучасної популяційної та...
Поширеність та причини виникнення хвороб копитець у корів
У статті наведено аналіз літературних даних щодо частоти виникнення та етіологічних факторів хвороб копитець у корів, зокрема різних клінічних форм пододерматитів. Встановлено, що на погіршення якості копитцевого рогу,...