Wpływ metod izolacji DNA na podobieństwo genetyczne linii pszenicy ozimej (Triticum aestivum L.) przy zastosowaniu techniki RA PD-PCR
Journal Title: Aparatura Badawcza i Dydaktycza - Year 2015, Vol 20, Issue 2
Abstract
Celem badań było porównanie wpływu 4 metod izolacji DNA na wynik analizy markerami molekularnymi RAPD-PCR (ang. Random Amplified Polymorphic DNA – Polymerase Chain Reaction) linii pszenicy ozimej. Przeprowadzono izolację DNA metodą Thomsona i Henry’ego, metodą kolumienkową przy pomocy kitu Quiagen DNeasy Plant Kit, przy pomocy kitu Genomic Mini AX Plant firmy A&A Biotechnology oraz zestawu Maxwell® 16 LEV Plant DNA Kit firmy Promega. Po izolacji przeprowadzono analizy molekularne RAPD-PCR, które wykorzystano jako wskaźnik służący do oceny metod izolacji DNA. Najlepszą metodą izolacji okazała się metoda z wykorzystaniem Quiagen DNeasy Plant Kit. Jakość DNA otrzymanego po izolacji tym kitem była najwyższa, a otrzymane elektroforogramy były najbardziej czytelne. Jest to jednak metoda izolacji DNA najdłuższa i najdroższa, co ogranicza jej wykorzystanie przy dużej liczbie badanych genotypów. Dobrą metodą izolacji DNA ze względu na jakość otrzymanych obrazów elektroforetycznych była metoda izolacji kitem Genomic Mini AX Plant. Metodą szybką i tanią okazała się metoda Thomsona i Henry’ego, niestety mniej wydajną w porównaniu do poprzednich. Metodą o największym zróżnicowaniu ilości otrzymanego DNA była izolacja z wykorzystaniem zestawu Maxwell.
Authors and Affiliations
Agnieszka Tomkowiak, Danuta Kurasiak-Popowska, Dorota Weigt, Sylwia Mikołajczyk
Keywords
Related Articles
- EP ID EP199186
- DOI -
- Views 76
- Downloads 0
Uproszczona analiza działania wentylacji grawitacyjnej w sezonie ogrzewczym na przykładzie danych meteorologicznych Warszawy
W artykule sprawdzono wpływ zmienności temperatury powietrza zewnętrznego i wielkości kanałów wentylacyjnych na zmienność intensywności wymiany powietrza w budynkach z wentylacją grawitacyjną w sezonie ogrzewczym. Wyznac...
The overview of reactors used for the production of precipitated calcium carbonate via carbonation route
Carbonation is one of the methods for the production of precipitated calcium carbonate (PCC) on the industrial scale. A gaseous CO2 is used as a reagent in this process. The hydrodynamic conditions gener- ated in the rea...
Analiza niezawodności systemu grawitacyjnego chłodzenia reaktora typu ESBWR
Celem niniejszej pracy jest przedstawienie metodologii analizy PSA, która jest wymagana przez Prawo Atomowe dla nowo powstających obiektów jądrowych, oraz zaprezentowanie metody drzew błędów, za pomocą, których zostało o...
Projektowanie rozbiórki obiektu budowlanego
Obiekty budowlane można budować, remontować i modernizować, niektóre trzeba też rozebrać. Roz- biórka, zgodnie z prawem budowlanym, to rodzaj robót budowlanych, polegających na demontażu i usunięciu z przestrzeni określo...
Metody odtworzenia kursu z danych GPS dla bezzałogowego statku powietrznego
Zastosowanie techniki satelitarnej GNSS dla celów wykonywania nalotów fotogrametrycznych z niskiego pułapu umożliwia wyznaczenie pozycji i orientacji bezpilotowego statku latającego. W artykule przedstawiono rezultaty wy...