Wpływ metod izolacji DNA na podobieństwo genetyczne linii pszenicy ozimej (Triticum aestivum L.) przy zastosowaniu techniki RA PD-PCR
Journal Title: Aparatura Badawcza i Dydaktycza - Year 2015, Vol 20, Issue 2
Abstract
Celem badań było porównanie wpływu 4 metod izolacji DNA na wynik analizy markerami molekularnymi RAPD-PCR (ang. Random Amplified Polymorphic DNA – Polymerase Chain Reaction) linii pszenicy ozimej. Przeprowadzono izolację DNA metodą Thomsona i Henry’ego, metodą kolumienkową przy pomocy kitu Quiagen DNeasy Plant Kit, przy pomocy kitu Genomic Mini AX Plant firmy A&A Biotechnology oraz zestawu Maxwell® 16 LEV Plant DNA Kit firmy Promega. Po izolacji przeprowadzono analizy molekularne RAPD-PCR, które wykorzystano jako wskaźnik służący do oceny metod izolacji DNA. Najlepszą metodą izolacji okazała się metoda z wykorzystaniem Quiagen DNeasy Plant Kit. Jakość DNA otrzymanego po izolacji tym kitem była najwyższa, a otrzymane elektroforogramy były najbardziej czytelne. Jest to jednak metoda izolacji DNA najdłuższa i najdroższa, co ogranicza jej wykorzystanie przy dużej liczbie badanych genotypów. Dobrą metodą izolacji DNA ze względu na jakość otrzymanych obrazów elektroforetycznych była metoda izolacji kitem Genomic Mini AX Plant. Metodą szybką i tanią okazała się metoda Thomsona i Henry’ego, niestety mniej wydajną w porównaniu do poprzednich. Metodą o największym zróżnicowaniu ilości otrzymanego DNA była izolacja z wykorzystaniem zestawu Maxwell.
Authors and Affiliations
Agnieszka Tomkowiak, Danuta Kurasiak-Popowska, Dorota Weigt, Sylwia Mikołajczyk
Keywords
Related Articles
- EP ID EP199186
- DOI -
- Views 90
- Downloads 0
WŁAŚCIWOŚCI MĄKI ORKISZOWEJ JAKO SUROWCA DO PRODUKCJI MAKARONU
Dokonano określenia właściwości mąki uzyskanej z przemiału ziarna pięciu odmian orkiszu pod kątem ich przydatności do produkcji makaronu. Dla porównania analizowano także surowiec z pszenicy durum i pszenicy zwyczajnej....
Methods of determination of pentosidine – the advanced glycation end-product of proteins
Glycation is a multi-step process that occurs spontaneously without the presence of enzyme, leading to the formation of AGEs – Advanced Glycation End-products. Glycation occurs in living organisms as well as in the food...
Aspekty prawne i techniczne stosowania czynnika CO2 w instalacjach chłodniczych
Czynniki chłodnicze stosowane w instalacjach chłodniczych, klimatyzacyjnych oraz pompach ciepła ze względu na negatywny wpływ na środowisko naturalne od kilku dekad podlegają coraz ostrzejszym regulacjom prawnym. Zgodnie...
Laboratory reactor for testing photocatalyst reactions in the liquid reagents – the solid catalyst system
The construction and the principle of operation of the laboratory reactor for testing photocatalyst reactions in the liquid reagents – the solid catalyst system have been described in the presented paper. Construction of...
Zanieczyszczenie grzybami mikroskopowymi różnych rodzajów ściółki stosowanej w kurnikach
Analizowano pod względem ilościowym i jakościowym poziom zanieczyszczenia grzybami mikroskopowymi 5 rodzajów ściółek pochodzących z kurników (kury nioski, stada 250-300 kur) zlokalizowanych na terenie Polski północno-zac...